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Ø 1 非洲猪瘟简介
非洲猪瘟（英文名称：African Swine fever，简称：ASF）是由非洲猪瘟病毒（英文名称：African Swine fever virus，简称：ASFV）感染家猪和各种野猪（如非洲野猪、欧洲野猪等）引起一种急性、出血性、烈性传染病。非洲猪瘟病毒是非洲猪瘟科非洲猪瘟病毒属的重要成员，病毒有些特性类似虹彩病毒科和痘病毒科。病毒粒子的直径为175－215纳米，呈20面体对称，有囊膜。基因组为双股线状DNA，大小170－190kb。在猪体内，非洲猪瘟病毒可在几种类型的细胞浆中，尤其是网状内皮细胞和单核巨噬细胞中复制。该病毒可在钝缘蜱中增殖，并使其成为主要的传播媒介。世界动物卫生组织（OIE）将其列为法定报告动物疫病，该病也是我国重点防范的一类动物疫情。
Ø 2 非洲猪瘟在我国的发病情况
自2018年8月3日我国确诊首例非洲猪瘟疫情以来，我国已经在辽宁、安徽、黑龙江、海南等地接连爆发非洲猪瘟疫情。尽管非洲猪瘟传入我国仅几年的时间，但已经在多地接连爆发，造成了巨大的经济损失，而且非洲猪瘟临床症状与猪瘟症状相似，只能依靠实验室监测确诊。在目前的情势下，急需一种能对非洲猪瘟进行快速检测的方案！
Ø 3 非洲猪瘟病毒(ASFV)实时等温扩增仪配置清单
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项目 |
序号 |
物品名称 |
型号规格 |
单位 |
数量 |
备注 |
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主 机 箱 |
1. |
仪器主机 |
HW-ZW16 |
台 |
1 |
|
|
2. |
仪器使用说明书 |
|
个 |
1 |
|
|
|
3. |
合格证/保修卡 |
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本 |
2 |
|
|
|
4. |
仪器电源线 |
|
根 |
1 |
|
|
|
5. |
铝合金箱 |
|
个 |
1 |
|
|
|
配 件 箱 |
6. |
电子天平 |
0-500g |
台 |
1 |
|
|
7. |
样品杯 |
50mL |
个 |
24 |
|
|
|
8. |
移液枪 |
1-5ml |
把 |
1 |
|
|
|
9. |
移液枪枪头 |
1-5ml |
包 |
1 |
|
|
|
10. |
移液枪 |
100μL-1000μL |
把 |
1 |
|
|
|
11. |
移液枪枪头 |
100μL-1000μL |
包 |
1 |
|
|
|
12. |
移液枪 |
10μL-100μL |
把 |
1 |
|
|
|
13. |
移液枪枪头 |
10μL-100μL |
包 |
1 |
|
|
|
14. |
移液枪 |
2μL-20μL |
把 |
1 |
|
|
|
15. |
移液枪枪头 |
2μL-20μL |
包 |
1 |
|
|
|
16. |
剪刀 |
|
把 |
1 |
|
|
|
17. |
镊子 |
|
把 |
1 |
|
|
|
18. |
研钵 |
直径8cm |
个 |
1 |
|
|
|
19. |
离心机 |
大龙D1008 |
台 |
1 |
|
|
|
20. |
离心管 |
1.5mL |
个 |
50 |
|
|
|
21. |
PCR管 |
0.2mL |
个 |
50 |
|
|
|
22. |
非洲猪瘟病毒荧光等温扩增检测试剂 |
48T/盒 |
盒 |
5 |
|
|
|
重 要 配 件 |
23. |
漩涡混匀器 |
|
台 |
1 |
|
|
24. |
畜牧恒温箱 |
-10℃~65℃ |
台 |
1 |
|
|
|
25. |
高速冷冻离心机 |
LC-LX-HR165A |
台 |
1 |
|
|
|
26. |
研磨仪 |
|
台 |
1 |
|
|
|
27. |
移液器（5种型号） |
|
支 |
10 |
|
|
|
28. |
冰箱 |
|
台 |
1 |
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Ø 4 非洲猪瘟病毒(ASFV)实时等温扩增仪技术参数
|
仪器型号 |
HW-ZW16 |
|
样品通量 |
16x0.2ml，兼容单管和8联管 |
|
加热方式 |
半导体制冷片结合电性电阻热红外技术 |
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温控范围 |
室温～85℃ |
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温控精度 |
±0.1℃ |
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温度均一性 |
±0.15℃ |
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激发光波长 |
第一通道：470nm±10nm |
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检测光波长 |
第一通道：520nm±10nm |
|
激发光 |
高亮度LED |
|
检测器 |
新型光学检测器，结合数字电路控制，光信号稳定 |
|
荧光传导方式 |
太空专用光纤传导 |
|
结果判读方式 |
根据扩增曲线软件自动判读阴阳性 |
|
结果显示 |
可在机器显示扩增曲线及出峰时间 |
|
检测时间 |
≤40分钟 |
|
检测试剂 |
开放式恒温荧光检测试剂 |
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操作软件 |
自带软件 |
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控制方式 |
触屏控制 |
|
检测项目 |
可同时最多检测16个项目 |
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检测灵敏度 |
10～109拷贝/反应，且样品间无交叉污染 |
|
仪器分析功能 |
根据所检测样品，直接分析判定阳性或阴性；也可通过标准品进行绝对定量 |
|
软件设置功能 |
可选择反应程序；可对反应程序进行设置，如可设置反应时间、可在反应过程中修改反应时间（缩短或延长）、可设置不同温度，每个温度档位差为0.1℃；可将反应程序保存为模板；可对不同孔进行重命名；可设置扫描间隔时间，范围为18～60S，默认间隔为 60S；可设置阴阳性判断阈值；阈值线可上下拉动等 |
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工作环境温度 |
18～35℃ |
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储存温度 |
-20℃～55℃ |
|
环境相对湿度 |
≤85% |
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工作电压 |
100～240V，50～60Hz |
Ø5 非洲猪瘟病毒荧光等温扩增检测试剂盒技术参数
作用与用途：
用于血液、血球粉、淋巴结、脾脏、扁桃体以及猪肉产品中非洲猪瘟病毒核酸的检测。
1.规格：
48次/盒；
2.保存条件：
-20℃保存；
3.组成：
荧光等温扩增免提取反应液：1100ul；Bst DNA聚合酶：75ul；阴性对照：1000ul；阳性对照：200ul；矿物油：1000ul；说明书：1份；
4.有效期：
12个月；
5.检测试剂盒应用范围
本试剂盒适用于便携式荧光定量PCR仪检测箱及各种其他型号荧光定量PCR仪；
6.反应体系：
25ul；反应时间：1h；报告基团：FAM；淬灭基团：None；
7.结果判定：
有明确判定标准，被检样品荧光信号有指数型增长，阳性对照Tt值≤45并出现典型的扩增曲线，阴性对照无Tt值并且无扩增曲线即S型扩增曲线，结果成立；被检样品Tt值≤45并出现典型的扩增曲线为阳性；被检样品无Tt值并且无典型扩增曲线为阴性；被检样品Tt值在45-60之间并出现典型的扩增曲线为可疑。对于可疑结果应重新检测，如果样品FAM通道仍有典型S型扩增曲线且Tt值≤60，则判定为阳性，否则为阴性；
8.试剂盒特性
本试剂盒经中国动物疫病预防控制中心评价，诊断敏感性100%，特异性100%；
9.推荐产品
该产品为疫控（诊）【2019】74号文件中推荐的产品；
10. 产品资质
产品生产厂家具有分子生物学类诊断制品GMP车间。